柱层析硅胶研制以来,受到了市场的广泛使用。其实在很多地方也都是可以看到它的身影的。为了让更多的人可以熟悉它。下面来介绍下柱层析硅胶的正确使用方法?如果你对这个问题感兴趣的话那就一起来看看吧。
柱层析硅胶的优点在使用的时候也都是比较多的。但是在操作的时候对于它的维护工作也是少不了的。比如说柱层析硅胶的纯度大于99%。与有机柱填料相比,硅胶是以二氧化硅为基质的固体胶体,结构致密。即使直接丢弃,有机物也会流失,目标产品也会受到污染。由于你想使用它,你需要知道的是它是用乙酸乙酯洗脱的:极性小的石油醚;如果极性大,则使用甲醇:模拟洗脱;如果极性大,用甲醇:水:正丁醇:乙酸洗脱;可以向尾部添加少量醋酸。我们还需要掌握正确使用它。例如,可以选择200-300目硅胶进行称重,称重量为装载量的30-70倍;如果难区分,也可以使用100倍量的硅胶H。干燥硅胶的表观密度约为0.4.因此需要做的是称取40g硅胶,并用烧杯测量100ml。然后将其搅拌成匀浆。添加两倍于干燥硅胶体积的溶剂,并用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱液为石油醚/乙酸乙酯/系统,则将其与石油醚混合;如果洗脱液是模拟/酒精系统,则使用模拟混合。
如果这些步骤完成,如果使用柱层析硅胶时无法将其搅拌成匀浆,则表明溶剂中的水含量过大,尤其是乙酸乙酯/。如果与分布色谱用水不兼容,建议此时须提前用无水硫酸钠干燥。用无水钙干燥,除去1%的酒精。如果样品对酸敏感,则不能使用模拟系统通过色谱柱。然后你可以安装色谱柱,用棉花塞住色谱柱底部,不要使用海砂,添加约1/3体积的石油醚(仿),当然,等待它安装储液球,打开色谱柱下的活塞,然后一次性将匀浆倒入储液球。随着沉淀,一些硅胶会粘附在液体存储球中,然后你可以用石油醚(仿)将其冲入色谱柱。然后可以将柱层析硅胶压实。沉淀后,添加更多石油醚,并用双球或气泵加压,直到流速恒定。其柱床被压缩至其体积的9/10左右。无论是常压塔还是加压塔,都应执行该步骤,这可以大大提高分离效果,避免由于通过塔时柱床收缩而导致开裂。当所有这些都完成后,您可以采样。干法和湿法都可以。柱层析硅胶是不必要的。加载样品后,添加一些洗脱液,然后将一个吸水棉球塞入硅胶表面。然后可以安全地添加大量洗脱液,而不会损坏硅胶表面。